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二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒

二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒

簡(jiǎn)要描述:二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒是植物光合作用中固定 CO2 的關(guān)鍵酶,同時(shí)參與植物光呼吸代謝途徑,制約著碳素向Calvin 循環(huán)和光呼吸循環(huán)分流,作為一種能夠催化羧化反應(yīng)和加氫反應(yīng)的雙功能酶,其活性的大小對(duì)光合速率的研究具有重要意義。

產(chǎn)品型號(hào): AKPL001U-1

所屬分類(lèi):氧化與抗氧化系列

更新時(shí)間:2021-11-17

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

詳情介紹
品牌BOXBIO/盒子生工貨號(hào)AKPL001U-1
規(guī)格25/24S供貨周期現(xiàn)貨
主要用途二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品/農(nóng)產(chǎn)品,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
檢測(cè)設(shè)備紫外分光光度計(jì)可檢測(cè)樣本數(shù)24 Samples
主要檢測(cè)設(shè)備及配套紫外分光光度計(jì)/1 mL石英比色皿(d=10 mm)預(yù)計(jì)測(cè)定時(shí)間3 h (25 Samples)
試劑儲(chǔ)存條件按照標(biāo)簽要求儲(chǔ)存需自備試劑無(wú)
檢測(cè)方法 NADH速率法檢測(cè)波長(zhǎng)340 nm
信號(hào)響應(yīng)遞增型
  • Rubisco可催化核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)和CO2結(jié)合生成3-磷酸甘油酸,3-磷酸甘油酸可進(jìn)一步在3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脫氫酶的催化作用下生成甘油醛-3-磷酸,反應(yīng)過(guò)程中伴隨著NADH氧化生成NAD+,NADH在340 nm處有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定340 nm處吸光度的下降速率即可表征Rubisco活性。

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  • 二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定過(guò)程中所需要的儀器和試劑:紫外分光光度計(jì)、1 mL 石英比色皿、恒溫水浴/培養(yǎng)箱、臺(tái)式 離心機(jī)、可調(diào)式移液器、研缽/勻漿器和蒸餾水。

  • 樣品處理 細(xì)菌或細(xì)胞:離心收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(mL為(500-1000):1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1 mL 提取液)處理樣品,冰浴超聲破碎細(xì)菌 或細(xì)胞(功率 20%200 W,超聲 3 s,間隔 10 s,重復(fù) 30 次),4℃ 10000 g 離心 10 min,取上清置 于冰上待測(cè)。 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:(5-10)的比例(建議稱(chēng)取約 0.1 g 組織, 加入 1 mL 提取液)處理樣品,冰浴勻漿,4℃ 10000 g 離心 10 min,取上清置于冰上待測(cè)。

  • 二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒吸光值測(cè)定:立即混勻放入 25℃水浴或培養(yǎng)箱中并開(kāi)始計(jì)時(shí),測(cè)定 20 s(總時(shí)間)時(shí) 340 nm 處吸光值,記為 A1 測(cè)定和 A1 空白;準(zhǔn)確反應(yīng) 300 s,測(cè)定 320 s(總時(shí)間)時(shí) 340 nm 處吸光值, 記為 A2 測(cè)定和 A2 空白;計(jì)算 ΔA 測(cè)定=A1 測(cè)定-A2 測(cè)定,ΔA 空白=A1 空白-A2 空白,ΔA=ΔA 測(cè) -ΔA 空白。注:空白組只需測(cè)定 1-2 次;準(zhǔn)確在 20 s 320 s 處完成讀數(shù),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確。






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